Ген переносчика восстановленных фолатов RFC1 (A80G, ГЕ163)

Описание анализа

Уникальность анализа заключается в его способности оценивать влияние на фолатный транспорт, предсказывая риск фолат-дефицитных состояний и взаимодействие с мутациями MTHFR. Также мутация A80G в гене RFC1 напрямую влияет на транспорт и внутриклеточное накопление метотрексата (MTX) — ключевого антифолатного препарата, используемого в лечении онкологических (острый лимфобластный лейкоз, лимфома), аутоиммунных (ревматоидный артрит, псориаз) и воспалительных заболеваний.

Функция гена RFC1

Ген RFC1 кодирует редуцированный фолатный транспортёр 1 (RFC1) — высокоспецифичный мембранный белок, обеспечивающий поглощение восстановленных фолатов (5-метилтетрагидрофолат) в клетки. Основные функции гена включают:

• Транспорт фолата: RFC1 обеспечивает натрий-зависимый транспорт фолата через плазменную мембрану, критически важный для эритроцитов, плаценты, кишечника и мозга, где фолат необходим для синтеза, метилирования и репарации ДНК.
• Поддержание метаболизма: Участвует в цикле метилирования, регулируя уровень гомоцистеина и предотвращая гипергомоцистеинемию; дефицит RFC1 снижает внутриклеточный фолат на 20–50%, нарушая пролиферацию клеток.
• Репродуктивная роль: В плаценте и эмбрионе RFC1 обеспечивает фолатный гомеостаз для заращения нервной трубки и предотвращения анеуплоидий; ген экспрессируется в тканях с быстрым делением, и его полиморфизмы влияют на биодоступность фолата.

Механизм действия метотрексата и роль RFC1

Метотрексат — структурный аналог фолиевой кислоты — проникает в клетки преимущественно через RFC1 — натрий-зависимый транспортёр с высокой аффинностью к MTX. RFC1 обеспечивает активный транспорт MTX против градиента концентрации. После проникновения MTX подвергается полиглутамилированию, что удерживает его внутри клетки и усиливает ингибирование дигидрофолатредуктазы и тимидилатсинтазы, из-за чего блокируется синтез ДНК/РНК и происходит апоптоз (гибель) клеток.

Последствия мутации

Мутация A80G в гене RFC1 — это функциональный полиморфизм, где G-аллель ассоциирована с сниженной эффективностью фолатного транспорта, приводящим к накоплению неметаболизированного фолата в плазме и дефициту внутриклеточного.

Мутация A80G не нарушает первичную структуру белка, но изменяет его конформацию, что приводит к снижению аффинности к MTX, особенно в гомозиготном состоянии (GG или Arg/Arg). Также нарушается локализация белка на мембране. Все это приводит к снижению накопления MTX в клетках и высокому риску резистентности, особенно при низкодозовой терапии ревматоидного артрита и ОЛЛ. В этом случае может потребоваться повышение дозы или смена препарата. Также на фоне дополнительной гомозиготной мутации 677TT в гене MTHFR при терапии высокими дозами MTX может развиваться гепато-/миелотоксичность.

Как помогает анализ на мутацию A80G

• Прогнозирование эффективности метотрексата: Генотип GG или AG снижает транспорт MTX в клетки на 15–50%, что приводит к недостаточному ингибированию синтеза ДНК. Анализ позволяет выявить риск резистентности заранее — особенно в онкологии (ОЛЛ у детей) и ревматологии (ревматоидный артрит). Это даёт возможность увеличить дозу MTX или перейти на альтернативные препараты (биологические, 6-меркаптопурин) до развития рецидива или неэффективности лечения.
• Снижение токсичности MTX: При GG-генотипе даже стандартные дозы могут вызывать миелосупрессию, мукозит или гепатотоксичность из-за дисбаланса между плазменным и внутриклеточным MTX. Анализ помогает уменьшить дозу или усилить мониторинг (анализы крови, печеночные пробы), предотвращая тяжёлые побочные эффекты.
• Оптимизация профилактики дефектов нервной трубки (НТД): У беременных с GG-генотипом стандартная доза фолиевой кислоты (400 мкг) неэффективна — фолат не попадает в клетки плода. Анализ позволяет увеличить дозу до 1–5 мг/сут или заменить на активные формы (метилфолат), снижая риск spina bifida, анэнцефалии и синдрома Дауна на 20–40%.
• Генетическое консультирование и семейное планирование: Мутация наследуется кодоминантно. При GG у одного или обоих родителей анализ помогает оценить риск для потомства (особенно в сочетании с MTHFR C677T) и принять решение о пренатальной диагностике или ЭКО с ПГД.
• Диагностика при неясных фолат-дефицитных состояниях: При нормальном уровне фолата в крови, но клинических признаках дефицита (анемия, гипергомоцистеинемия, неврологические нарушения), анализ выявляет внутриклеточный дефицит из-за нарушения транспорта. Это исключает ненужные обследования и направляет на правильную терапию.
• Комбинированный скрининг с MTHFR: Мутация A80G часто сочетается с MTHFR C677T. Анализ RFC1 в комплексе позволяет составить генетический профиль фолатного метаболизма, что особенно важно при рецидивирующих выкидышах, хромосомных аномалиях плода, неэффективности стандартной витаминотерапии.

Анализ на A80G RFC1 включён в следующие нормативные документы:

• Клинические рекомендации «Острый лимфобластный лейкоз у детей» (2021, Минздрав РФ): Рекомендуется фармакогенетическое тестирование RFC1 и MTHFR перед поддерживающей терапией MTX для прогнозирования эффективности и токсичности.
• Клинические рекомендации «Ревматоидный артрит» (2020): Включён в алгоритм оценки резистентности к MTX при неэффективности стандартных доз.
• Протоколы Российской ассоциации онкогематологов (2020): Обязательное тестирование RFC1 A80G + MTHFR C677T у детей с ОЛЛ перед назначением MTX.
• Клинические рекомендации «Профилактика дефектов нервной трубки» (2020): Рекомендуется при рецидивирующих НТД или неэффективности стандартной фолиевой профилактики.

Кому показан анализ на мутацию A80G в гене RFC1

• Пациентам перед терапией метотрексатом (ОЛЛ, лимфома, ревматоидный артрит)
• Женщинам при планировании беременности с риском НТД или синдрома Дауна
• При неэффективности стандартной терапии фолиевой кислотой
• Семьям с рецидивирующими выкидышами или хромосомными аномалиями
• Пациенты с гиперфолатемией и дефицитом внутриклеточного фолата
• Комбинированный скрининг с MTHFR C677T